腺相关病毒包装

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腺相关病毒包装服务

腺相关病毒( adeno-associated virus，AAV) 是一类细小病毒，基因组为单链DNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。重组腺相关病毒（recombinant AAV, rAAV）是利用AAV2 型基因组与不同血清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体病毒载体，可将目的基因的CDS 区序列或者RNAi 干扰序列插入rAAV 表达质粒中，包装病毒后感染细胞完成对目的基因的操作。腺相关病毒具有感染温和，免疫原性小，长效稳定表达的特点，主要应用于动物体内注射。源井生物提供的腺相关病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过qPCR对病毒基因拷贝进行滴定。腺相关病毒的滴度在10^12~10^13GC/ml，可以满足各类整体实验的使用要求。

腺相关病毒包装服务详情 AAV Packaging Service Details

基因敲除腺相关病毒 Knockout AAV

源井生物构建基因敲除腺相关病毒载体并包装为腺相关病毒，经过超速离心纯化后，可用于动物定位注射和整体注射实验。细胞感染腺相关病毒后，可稳定表达gRNA和Cas9蛋白，达到敲除靶基因的目的。在线咨询

基因敲除腺相关病毒载体选择：

YKO系列载体	载体名称	荧光抗性
腺相关病毒YKO系列载体	YKO-AAV001-gRNA	EGFP
腺相关病毒YKO系列载体	YKO-AAV002-gRNA	mCherry

腺相关病毒由于病毒包装范围限制可选用SaCas9蛋白，gRNA和SaCas9蛋白构建在同一病毒上可提供转染效率。

基因表达腺相关病毒 Expression AAV

源井生物通过构建基因干扰腺相关病毒载体并包装为腺相关病毒，经过超速离心纯化后，可用于动物定位注射和整体注射实验。在线咨询

基因干扰腺病毒载体选择：

YOE系列载体	载体名称	荧光抗性
腺相关病毒YOE系列载体	YOE-AAV001	EGFP
腺相关病毒YOE系列载体	YOE-AAV002	mCherry

源井生物还可提供多种哺乳动物组织特异性启动子供客户自由选择，可实现体内组织特异性表达，点击查看 shouzhi

名称	描述	组织特异性	细胞类型特异性	参考文献
Nes	Rat nestin intron 2 enhancer fused to mouse Hsp68 minimal promoter	Nervous system at embryonic stage	Neural stem/pro-genitor cells	Eur J Neurosci. 9:452 (1997); J Neurosci Res. 59:321 (2000)
Camk2a_short	Mouse α-calcium-calmodulin dep-endent kinase II promoter (1.3 kb)	Brain	Pyramidal neurons	Neuroscience. 161:441 (2009)
SYN1	Human synapsin I promoter	Brain	Mature neurons	Mol Ther. 5:509 (2002)
Nes	Rat neuron-specific enolase promoter	Nervous system	Various neurons	Neuron. 5:187 (1990); J Mol Neurosci. 8:63(1997)
GFAP_short	Human glial fibrillary acidic protein promoter (0.68 kb)	Brain	Astrocytes	Glia. 56:481 (2008)
K14	Human keratin 14 promoter	Epidermis	Keratinocytes	Gene. 153:297 (1995)
cTnT	Chicken cardiac troponin T promoter	Heart	Cardiomyocytes	Am J Physiol Cell Physiol. 286:C556 (2004); Gene Ther. 18: 43 (2011); Circ Res. 115:354 (2014)
alphaM-HC_short	Mouse α-cardiac myosin heavy chain promoter (2.8 kb)	Heart	Cardiomyocytes	Neuroscience. 161:441 (2009)
Myog	Mouse myogenin promoter	Muscle	Myoblasts	Genes Dev. 7:1277 (1993)
MHCK7	Composed of enhancer/promoter regions of murine muscle creatine kinase (MCK) and enhancer region of α-myosin heavy-chain genes.	Genes Dev. 7:1277 (1993)	Differentiated postmitotic stria-ted muscle cells	Mol Ther. 15:320 (2007); Sci Transl Med. 9(418) (2017)
SM22a	Mouse transgelin (a.k.a. Sm22a) promoter	Adult smooth muscle	Vascular smooth muscle cells	J Cell Biol. 132:849 (1996)
EnSM22a	The chimeric vascular smooth muscle-specific enhancer/promoter (The rabbit myosin heavy-chain enh- ancer inserted upstream of a truncated mouse SM22a promoter)	Adult smooth muscle	Vascular smooth muscle cells	J Pharmacol Exp Ther. 329: 775 (2009)
Tie1	Mouse tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1 promoter	Blood vessel	Endothelial cells	J Cell Sci. 115:2075 (2002)
CD68_short	Human CD68 promoter, short, recommended for in vitro use	Blood	Monocytes and macrophages	Gene Ther. 19:1041 (2012)
Alb	Mouse albumin promoter	Liver	Mature hepatocytes	Genes Dev. 1:268 (1987)
TBG	Human thyroxine-binding globulin promoter	Liver	Hepatocytes	Gene. 506:289 (2012)
MMTV	Mouse mammary tumor virus long terminal repeat (LTR)	Mammary gland	Ductal cells of the salivary gland, mammary epithelial cells	Nucleic Acids Res. 25:4323 (1997)
HIP	Human insulin promoter	Pancreas	β cells	Cell. 52:773 (1998); Proc Natl Acad Sci U S A. 100: 6688 (2003)
Pdx1	Mouse pancreatic and duodenal homeobox 1 promoter	Embryonic develo-ping pancreas and adult pancreatic islets	Pancreatic proge-nitor cells and pancreatic β cells	Development. 129:2447 (2002)
SP-B	Human surfactant protein B promoter	Lung	AT II cells (alveolar type II epithelial cells) and Clara cells (bronchiolar epithelial cells)	J Biol Chem. 270:24852 (1995); Gene Ther. 14:1461 (2007)
CD144	Human cadherin 5 (a.k.a. VE-Cadherin) promoter	Lung, heart, ovary, spleen and kidney glomeruli	Vascular endothelial cells	Oncogene. 24:2992 (2005)

基因干扰腺相关病毒 Knockdown AAV

源井生物通过构建基因干扰腺相关病毒载体并包装为腺相关病毒，经过超速离心纯化后，可用于动物定位注射和整体注射实验。在线咨询

YSH系列载体	载体名称	荧光抗性
腺相关病毒YSH系列载体	YSH-AAV001-shRNA	EGFP
腺相关病毒YSH系列载体	YSH-AAV002-shRNA	mCherry

另外，源井生物还可提供多种哺乳动物组织特异性启动子供客户自由选择，可实现体内组织。

产品规格 Product Specs

规格	交付标准	应用	周期	价格
标准规格病毒	1*10^11 GC	用于细胞转导	2-3周	在线咨询添加官方微信号： 18054268871（手机同号）
纯化标准规格病毒	1*10^12 GC	用于体内注射	2-3周
纯化大包装规格病毒	1*10^13 GC	用于体内注射	2-3周

不同血清型的AAV组织感染嗜亲性各不相同，表现出一定的器官靶向特异性。

下表列举了不同的AAV血清型及对应的组织亲和性:

血清型	组织亲和性
AAV1	SM,CNS,lung,retina,pancreas,heart,liver
AAV2	SM,SNS,liver,kidney,retina
AAV3	SM
AAV4	CNS,retina,lung,kidney
AAV5	SM,CNS,lung,retina
AAV6	SM,heart,lung,adipose,liver
AAV7	SM,retina,CNS,liver
AAV8	SM,CNS,retina,liver,pancreas,heart,kidney,adipose
AAV9	SM,lung,liver,heart,pancreas,CNS,retina,testes,kidney
AAVrh10	SM,lung,liver,heart,pancreas,CNS,retina,kidney
AAVPHP.B	CNS
AAVDJ/8	SM, liver, CNS, retina
AAVPHP.S	PNS
AAVPHP.eB	CNS（stronger than AAVPHP.B）

服务流程及质量控制：

三种病毒的比对:

类型	重组慢病毒	重组腺病毒	重组腺相关病毒
来源	HIV-1	5型腺病毒	AAV2
基因组	两条线性的、连续的单链 RNA	一条线性的、连续的双链DNA	一条线性的、连续的单链DNA
基因组⼤小	野⽣生病毒：约9.2 kb	野⽣生病毒：约36 kb	野⽣生病毒：约4.7 kb
基因表达时间	长时间稳定表达	短暂表达	长时间表达
整合到细胞基因组	是	否	低频整合
免疫原性	低	高	很低
包装能⼒	约6.4 kb	约8.3 kb	约4.7 kb
优点	· 应用范围广； · 转导效率高； · 稳定遗传。	· 转导效率高； · 可携带大片段目的基因； · 可扩增病毒。	· 免疫原性低； · 安全性高； · 有组织特异性亲和能力。