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1、技术原理:
源井生物采用Tol2转座系统构建转基因斑马鱼,转座系统包括转座子和转座酶两部分。需要整合的表达框位于表达质粒的两个转座子之间,转座酶质粒经过体外转录为mRNA之后,与表达质粒共注射,利用转座的原理,转座酶可以将两个转座子之间的序列剪切下来,粘贴到斑马鱼受精卵基因组中,后续经过基因型鉴定,筛选出成功整合的个体进行传代。
利用Tol2转座系统构建转基因斑马鱼
2、技术优势:
源井生物采用Tol2转座系统,整合效率高,周期短;
3、应用:
药物筛选;疾病模型构建;基因功能研究
※除了斑马鱼的基因编辑,源井生物还提供化合物功效与安全性的筛选与评价。
小分子化合物的筛选一直是研究的重点,传统的化合物筛选方法包括体外筛选(细菌、酵母、体外培养的哺乳动物细胞)和简单的无脊椎模式生物筛选(果蝇、线虫)。前者体外培养的细胞无法模拟体内细胞外的微环境,而且一些特殊类型的细胞和大多数器官无法在体外培养或重建。后者缺乏复杂的系统和器官,其形态和结构也与人类相去甚远。所以这两种筛选方法都有局限性,斑马鱼作为化合物筛选的模式动物,提供了一个完整的活体脊椎动物系统,兼之其强大的繁殖能力和低廉的饲养成本,使得体内模型的生物学复杂性与高通量筛选的能力结合在一起,为化合物筛选带来很大的便利。
源井生物已经积累了许多斑马鱼药物功效及安全性评估的经验,常见筛选项目如下:
· 心血管类疾病药物筛选
· 抗肿瘤药物筛选
· 神经系统疾病药物筛选
· 肝脏疾病药物筛选
· 化妆品美白功能
· 药物跨血脑屏障评价
· 化合物急性毒性评价
· 化合物慢性毒性评价
· 化合物心血管毒性评价
· 化合物肝脏毒性评价
案例1—心脏功能评价
案例2—血管新生评价
案例3—黑色素生成评价